El Sentido 5' hacia 3' designa el sentido de la síntesis (por una polimerasa) de las cadenas de ADN. Durante la síntesis cada nuevo nucleótido viene a unirse al extremo 3' de la cadena (extremidad que se termina por la ribosa o la desoxiribosa), estando éste leído en sentido contrario (en el sentido 3' hacia 5') porque las cadenas que van a ser sintetizadas son complementarias y antiparalelas. La síntesis puede no hacerse en el sentido de la lectura que es el sentido de lectura de la cadena de ADN no codante (sentido inverso de 5' hacia 3').